技术服务
RT-PCR
逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription PCR,RT-PCR),是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式
扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,利用变性,退火和延伸多步
骤、多循环来扩增目的DNA片段。在该反应过程中,目的DNA产量呈指数增长,使一些极为微量RNA样品检测成为可能。
实验步骤:
1. 样品获取、处理和制备
1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管
中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。
1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,
然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。
1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。
1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。
2. RNA或DNA质控
3. 反转录
4. PCR扩增
5. 琼脂糖凝胶电泳
我们提供:
1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本
2. 操作步骤及详细的试剂和耗材
3. 引物序列
4. 琼脂糖电泳图
5. 原始数据及处理后的正式实验数据
结果示意图:
服务周期:
服务内容 |
说明 |
价格 |
实验周期 |
RT-PCR |
提供目的基因片段 |
100元/基因/样 |
7个工作日 |
温馨提醒: